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CRISPR那些事儿
一个有温度的学习基因编辑学习中心
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FAQ
我们主要给予哪些类型的基因干扰技术服务？（例如：siRNA转染、shRNA慢病毒/腺病毒、CRISPRi）
| 技术类型 | 适用场景 | 交付形式 |
|---|---|---|
| siRNA转染 | 快速验证（72-96小时效果） | 快速验证（干扰后细胞/实验报告） |
| shRNA病毒载体 | 长期抑制（稳定株筛选） | 病毒颗粒/稳转株细胞 |
| CRISPRi | 高特异性、抑制（i）基因 | dCas9细胞系+gRNA载体 |
siRNA、shRNA和CRISPR干扰（CRISPRi）有什么区别？我该如何选择？
| 参数 | siRNA | shRNA（病毒载体） | CRISPRi |
|---|---|---|---|
| 作用周期 | 瞬时（5-7天） | 长期（可稳定传代） | 长期稳定 |
| 细胞适用性 | 易转染细胞 | 广谱（包括难转染细胞） | 需要构建dCas9细胞系 |
| 脱靶风险 | 中-高 | 中 | 极低 |
| 用途 | 快速验证 | 动物/细胞模型 | 高精度调控 |
为什么选择球盟会生物基因点突变服务？
球盟会生物基因全新升级第七代Bingo™ Prime Editing (PE7），优化编辑蛋白和RNA编辑活性。对比第五代PE技术，点突变成功率和基因编辑效率显著提升，全球知名院校博士专家团队一对一服务。
什么是基因过表达？
基因过表达指的是顺利获得各种技术手段使某个特定基因在细胞或生物体中表达水平显著高于正常水平。这通常是顺利获得引入额外的基因拷贝或使用强启动子驱动基因表达来实现的。
诱导多能干细胞（iPSC）是什么？
诱导多能干细胞（iPSC）是一类顺利获得将成体细胞重新编程为多能状态的细胞。它们具有类似于胚胎干细胞的特性，能够分化为体内的几乎所有细胞类型。这种技术允许科学家在体外生成各种细胞类型用于研究和治疗，而不需要使用胚胎干细胞。
KO细胞系与基因敲除动物模型有什么区别？
KO细胞系和基因敲除动物模型都用于研究基因功能，但它们各自有不同的应用场景和优势。KO细胞系在体外实验中使用，适用于高通量筛选和细胞水平的基因功能研究。基因敲除动物模型则在体内实验中使用，适用于研究基因在整个生物体中的功能及其与其他基因和环境的相互作用。
如何选择合适的细胞进行文库筛选？
细胞选择可以遵循以下原则：
1）与研究目的相符
2）sgRNA文库靶向的基因要与细胞的属源相符
3）细胞可以稳定传代
4）转染效率高
尽量不选用原代细胞。由于原代细胞无法稳定传代，可能在文库筛选实验的过程中，原代细胞已经出现大量死亡，无法完成实验。如果选用原代细胞进行文库筛选，为分析决上述的风险，可以顺利获得降低细胞覆盖度和选择gRNA数较小的文库进行筛选，尽可能降低文库细胞池的数量和缩短实验周期。
1）与研究目的相符
2）sgRNA文库靶向的基因要与细胞的属源相符
3）细胞可以稳定传代
4）转染效率高
尽量不选用原代细胞。由于原代细胞无法稳定传代，可能在文库筛选实验的过程中，原代细胞已经出现大量死亡，无法完成实验。如果选用原代细胞进行文库筛选，为分析决上述的风险，可以顺利获得降低细胞覆盖度和选择gRNA数较小的文库进行筛选，尽可能降低文库细胞池的数量和缩短实验周期。
是否支持定制化报告细胞系？
可根据研究目标定制特定信号通路、启动子或报告基因组合的报告细胞系。
报告信号是否稳定且具有可重复性？
经验证的稳定报告细胞系在多代传代中可保持一致的信号响应，适用于定量和比较分析。
报告细胞系主要用于哪些研究？
主要应用于信号转导机制研究、基因调控分析、受体-配体相互作用研究以及药物筛选与功能验证。
什么是报告细胞系？
报告细胞系是顺利获得稳定表达报告基因，用于指示特定基因转录活性或信号通路状态的功能性细胞模型。
常用的报告系统有哪些？
常见报告系统包括荧光素酶（Luciferase）和荧光蛋白（如 GFP、RFP），可根据实验需求选择不同检测方式。
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